手推式脂质体挤出器的使用方法可分为以下步骤,结合操作要点与注意事项总结如下:
一、操作前准备
1、部件检查与预处理
检查O型圈是否磨损,如有需更换原装零件,避免泄压风险。
彻底清洗挤出器组件(如膜、微米孔板),建议用超声波清洗并多次用纯水预挤压,确保通道通畅。
聚碳酸酯膜需移除蓝色保护膜,仅保留白色膜片,安装时用样品浸润以避免气泡影响挤出效率。
2、样品预处理
若脂质体混悬液含大颗粒或聚集物,建议先通过均质处理减小粒径,避免堵塞滤膜。
确保样品已均匀分散,减少沉淀风险。
二、操作步骤
1、组装与装样
按“三明治结构”安装滤膜组合(如聚碳酸酯膜+助滤膜)。
将预处理后的样品装入气密性玻璃注射器,连接挤出器腔体,确保沿针口插到底后轻拧固定。
2、挤出操作
首次挤出:缓慢均匀推动注射器活塞,保持用力方向与注射器轴线一致,使样品通过滤膜流向另一侧空注射器。
多次挤出:完成后交换两侧注射器位置,重复推动以实现多次挤压(通常需3-10次),直至达到粒径均一度的要求。
控温需求:若需恒温操作,可将整套设备置于热水浴中。
三、注意事项
1、操作规范
全程保持用力均匀,避免方向偏移导致注射器折断或漏液。
注射器拧紧时仅需轻拧固定,过度用力可能损坏螺纹结构。
2、故障处理
漏液问题:优先检查螺母是否拧紧;若仍漏液需重新组装滤膜或更换密封件。
挤出困难:检查滤膜是否堵塞,或确认未误装蓝色保护膜。
四、优化建议
1、样本量选择:手推式挤出器适合微量样品(0–1 mL),实验初期建议小批量测试工艺参数。
2、膜孔径选择:根据目标粒径选择合适孔径的径迹蚀刻膜(如100 nm膜可获得约100 nm粒径的脂质体)。
3、记录参数:记录挤出次数、压力变化及最终粒径分布,便于工艺优化。
通过上述步骤,可高效完成脂质体的粒径均一化制备,同时降低操作风险。